问题解答
高通量组织研磨仪提取动物组织样品时的各种疑问解答
很多用户在使用高通量组织研磨仪进行实验时操作进行研磨时会产生很多疑问,例如:?动物毛发、人类头发蕴藏着大量的信息,如何能在不损害成分的情况下,进行破碎研磨?动物组织韧性大,一般研磨无法完成,该怎么办?塑料对温度太敏感了,很容易变形,怎么粉碎检测?牙齿是人体最坚硬的部分,想要检测成分,该如何快速研磨呢?电路板要进行rohs检测,什么样的前处理能更有利于检测?
提取的方法:
样品采集、制备和组织研磨:采集新鲜动物组织样本,修剪至约50-100mg湿重,在液氮中快速冷冻,并保存在-80℃低温冰箱中。样品来自于人、狗、猫、老鼠、牛、马、还有鱼和蛤,在提取DNA或RNA之前,将这些冷冻后的组织,放入深孔板中,并将深孔板放置在干冰上冷冻。每个孔中放入两颗4m钢珠,再加入500mL缓冲液(应用生物系统核酸纯化裂解缓冲液)。
用深孔板盖板密封,在高通量组织研磨仪上以每分钟1000次的速度研磨2min。4℃环境下培养30min后,用裂解液提取gDNA或总RNA。使用高通量组织研磨仪优化后,再使用6700全自动核酸工作站进行实时PCR,最后提取的RNA或DNA的组织量在10到20mg之间。为了评估提取的基因组DNA的质量,开发了针对单个拷贝基因的物种特异性系统,以定量基因组当量和细胞数量。
使用高通量组织研磨仪来研磨动物组织,可以快速高通量的完成样品制备,且核酸提取量高、提取的核酸质量更好,满足各样品的研磨实验,如塑料玩具/婴幼儿用品、电路板、肉类(牛肉/鸡肉/鱼肉)、狗粮、毛发(人类 、动物)、橡胶、牙齿、聚四氟乙烯、骨骼、土豆(各类俗称及类似食物)、聚乙烯(器具-低密度/高密度)、热塑性塑料(可回收的),如塑料瓶、橡热固性塑料(不可回收) 如:环氧树脂、酚醛树脂、地毯、木材等。
高通量组织研磨仪采用电磁撞子专利研磨技术,将装有样品的密闭容器浸入液氮中,在-196℃环境下,快速彻底地粉碎样品,使研磨时间更短,研磨样品更为精细,同时保证样品性质不发生变化,是公认的“终极研磨手段”,广泛应用于生物化学、动植物、医学、矿物学、材料科学等领域。